Tinción de Gram.
Esta es una tinción diferencial usada para demostrar las propiedades tintoriales de bacterias de todos los tipos.
Las bacterias grampositivas retienen el colorante de cristal violeta después de la decoloración y se ven de color azul oscuro.
Las bacterias gramnegativas no son capaces de retener el colorante cristal violeta después de la decoloración y se contratañen de color rojo con el colorante de safranina.
Las características tintoriales pueden ser atípicas en cultivos muy jóvenes, viejos, muertos o en degeneración.
Técnica.
- Se hace un frotis delgado del material a estudiar y se deja secar al aire.
- Se fija el material en el portaobjeto pasándolo 3 o 4 veces a través de la llama de un mechero de modo que el material no sea lavado durante el procedimiento de tinción.
- Se coloca el frotis sobre un soporte para tinción y se cubre la superficie con solución de cristal violeta.
- Después de "un" minuto de exposición al cristal violeta se lava totalmente con agua destilada.
- Se cubre el frotis con solución de yodo de Gram durante "un" minuto. Se lava nuevamente con agua.
- Se sostiene el frotis entre los dedos pulgar e índice y se cubre la superficie con unas gotas de decolorante de alcohoy y acetona hasta que no se desprenda color violeta.
- Se lava con agua corriente y se coloca otra vez sobre el soporte. Se cubre la superficie con contratinción de safranina durante un minuto. Se lava con agua.
- Se coloca el preparado en posición vertical dejando que drene el exceso de agua.
- Se examina el frotis en el microscopio.
Interpretación.
Las bacterias grampositivas se tiñen de color azul oscuro y las bacterias gramnegativas se ven de color rojo rosado.
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